SignalStar^™ Multiplex IHC 的抗体验证

SignalStar Multiplex IHC 是一种先进技术，其使用特定的一抗和荧光检测试剂同时标记 FFPE 组织样品中的多种细胞蛋白质。它在可视化和分析组织样品中的蛋白质表达方面具有高准确性和可靠性。

由于 CST 独立验证每个应用中的所有抗体，因此只有当我们专门验证了 SignalStar Multiplex IHC 抗体可与 SignalStar 技术结合使用后，才会推荐这些抗体。这意味着您可以确信 SignalStar 抗体每次都会像预期保证的那样在您的检测中发挥作用。

我们提供专家支持以优化 SignalStar Multiplex IHC 技术的应用，从而减少您的研究时间。我们的团队可以回答问题并提供技术援助。

验证步骤：

• 在执行 SignalStar 验证之前，所有 SignalStar 抗体都必须通过严格的 IHC-P 验证流程。
• SignalStar 技术直接与传统的 DAB 序列切片显色标记进行比较，以确认特异性。
• SignalStar 寡核苷酸偶联抗体在所有可用的荧光信道和成像轮次中针对多种多重检测板变化进行了优化。
• SignalStar 测定法通过独特的重复实验、仪器、天数以及自动化与手动实验步骤得到了验证。
• 使用 SignalStar 寡核苷酸偶联抗体进行显色染色，用于抗原特异性在整个偶联过程中保持不变。
• 在已知表达目的靶标的阳性对照组织上检测抗体。
• 考虑靶标的亚细胞定位和共定位。
• 在相关癌症模型中，使用人类癌症组织阵列（这些阵列用于证明在广泛的组织类型中的抗体性能）评估 SignalStar 寡核苷酸偶联抗体的性能。
• 彻底的批次检测可确保获得准确 SignalStar 结果所需的可重现性。预先决定和指定稀释度和实验步骤。

显色比较

与使用 Pan-Keratin (C11) Mouse mAb #4545（右上图）、PD-L1 (E1L3N) XP® Rabbit mAb #13684（右上中图）、CD20 (E7B7T) XP® Rabbit mAb #48750（右下中图）和 CD8α (D8A8Y) Rabbit mAb #85336（右下图）对石蜡包埋的人胃腺癌组织的序列切片进行的显色免疫组织化学分析相比较，使用 Pan-Keratin (C11) & C0-0003-488 SignalStar Oligo-Antibody Pair #63566（左上图，绿色）、PD-L1 (E1L3N) & C0-0005-594 SignalStar Oligo-Antibody Pair #28249（左上中图，黄色）、CD20 (E7B7T) & C0-0011-647 SignalStar Oligo-Antibody Pair #36775（左下中图，红色）和 CD8α (D8A8Y) & C0-0004-750 SignalStar Oligo-Antibody Pair #62750（左下图，青色）对石蜡包埋的人胃腺癌组织进行 SignalStar 多重免疫组织化学分析。所有荧光团都被分配了伪彩，如图所示。在 Leica Biosystems 的 BOND RX 全自动研究染色机上执行所有实验步骤。与显色性相比，在 SignalStar 检测 (n=2) 的序列切片的目标匹配区域中定量阳性细胞的百分比。

偶联物优化

A) 使用 CD3ε (D7A6E) & C0-0001- 488 SignalStar Oligo-Antibody Pair #92856（左上图，绿色）、CD3ε (D7A6E) & C0-0001-594 SignalStar Oligo-Antibody Pair #84634（右上图，黄色）、CD3ε (D7A6E) & C0-0001-647 SignalStar Oligo-Antibody Pair #33888（左下图，红色）、CD3ε (D7A6E) & C0-0001-750 SignalStar Oligo-Antibody Pair #51754（右下图，青色）对石蜡包埋的人非小细胞肺癌组织进行 SignalStar 免疫组织化学分析。所有荧光团都被分配了伪彩，如图所示。在 BOND RX 自动染色机上进行了染色。B) 与第二次成像轮次（右图）相比较，使用 Vimentin (D21H3) CO-0012-750 SignalStar Oligo-Antibody Pair #61002（上图，青色）或 HER2/ErbB2 (D8F12) & CO-0019-488 SignalStar Oligo-Antibody Pair #31149（下图，绿色）对石蜡包埋的人乳腺浸润性导管癌组织（第一次成像轮次（左图））的序列切片进行 SignalStar 免疫组织化学分析。所有荧光团都被分配了伪彩，如图所示。在 BOND RX 自动染色机上进行了染色。

实验步骤验证

使用 Granzyme B (D6E9W) & CO-0009-647 SignalStar Oligo-Antibody Pair #37369（洋红色）或 Pan-Keratin (C11) & C0-0003-647 SignalStar Oligo-Antibody Pair #16373（红色）对石蜡包埋的人结直肠腺癌组织的序列切片进行 SignalStar 免疫组织化学分析，并且使用手动实验步骤（左图）进行染色（左图）与 Bond RX 实验步骤（右图）相比较。所有荧光团都被分配了伪彩，如图所示。