Cell Signaling Technology

免疫荧光技术支持

注释: 为最大程度的保证实验结果,我们推荐客户严格遵循CST的实验操作方法 ,这些实验方法经过CST科学家的反复验证,能够保证实验结果的精确性和可重复性

为了确保能够得到及时的解决方案,当您与我们取得联系时,请准备好以下信息。技术支持,请拨打免费电话: 4006-473287,邮件:tech@cst-c.com.cn

常见问题

  1. 公司/学校名称。
  2. 显微镜/成像系统的型号。
  3. 激发源(特定的激光,汞球管等)。

抗体信息

  1. 产品目录号。
  2. 批号(印刷在试管的标签上)。
  3. 你使用时的稀释度。
  4. 二抗(如果你没有使用偶联抗体)。
  5. 二抗供销商/产品目录号。
  6. 荧光染料(例如:FITC)。
  7. 二抗稀释度。
  8. 您以前使用这个二抗做免疫荧光实验是否成功?

样品

  1. 类型:
    1. ICC/细胞株
    2. 石蜡切片
    3. 固定的冰冻切片
    4. 新鲜的冰冻切片
  2. 样本来源(细胞株或者组织,物种)。
  3. 细胞/组织是如何进行固定前处理的(配体,抑制剂等)?
  4. 固定方法(浸入式,灌注式)。
  5. 描述样品固定和样品前处理步骤,包括固定的类型,培养时间和浓度。
  6. 如果使用细胞株,在细胞被处理后和固定前经历了多长时间?
  7. 在切片/固定和染色之间经过了多长时间?
  8. 没有染色的部分是怎么保藏的?

 

 

染色步骤

  1. 抗原修复
  2. 封闭方法
  3. 稀释缓冲液(包括去污剂)
  4. 一抗的培养时间和温度
  5. 二抗的孵育时间和温度
  6. 请列出在相同的Slide上使用的其他一抗
  7. 您是否确定目标蛋白存在于这些细胞/组织中?
  8. 如果您使用一个磷酸化抗体,这个实验步骤是否已经显示能够影响这个目标蛋白的磷酸化(经发表过的参考文献或者其他应用确认)?
  9. 阳性对照(已处理的细胞,可替换的组织等)。
  10. 阴性对照:
    1. 没有一抗
    2. 同型对照
    3. 不反应的细胞/组织
  11. 同型对照抗体的Ig浓度,如果可以适用的话。

技术服务 

 

 

 

learn new product