Cat. # | Size | Price | Inventory |
---|---|---|---|
37020S | 100 µl (50 tests) |
REACTIVITY | H |
SENSITIVITY | Endogenous |
MW (kDa) | |
Source/Isotype | Rabbit IgG |
Product Information
Application | Dilution |
---|---|
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) | 1:50 |
All reagents required for this protocol may be efficiently purchased together in our Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593, or individually using the catalog numbers listed below.
NOTE: Prepare solutions with reverse osmosis deionized (RODI) or equivalent grade water.
NOTE: When including fluorescent cellular dyes in your experiment (including viability dyes, DNA dyes, etc.), please refer to the dye product page for the recommended protocol. Visit www.cellsignal.com for a full listing of cellular dyes validated for use in flow cytometry.
NOTE: Adherent cells or tissue should be dissociated and in single-cell suspension prior to fixation.
NOTE: Optimal centrifugation conditions will vary depending upon cell type and reagent volume. Generally, 150-300g for 1-5 minutes will be sufficient to pellet the cells.
NOTE: If using whole blood, lyse red blood cells and wash by centrifugation prior to fixation.
NOTE: Antibodies targeting CD markers or other extracellular proteins may be added prior to fixation if the epitope is disrupted by formaldehyde and/or methanol. The antibodies will remain bound to the target of interest during the fixation and permeabilization process. However, note that some fluorophores (including PE and APC) are damaged by methanol and thus should not be added prior to permeabilization. Conduct a small-scale experiment if you are unsure.
NOTE: Count cells using a hemocytometer or alternative method.
posted July 2009
revised June 2020
实验步骤编号:407
人
使用与人 TRAIL 蛋白 Lys60 周围残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
肿瘤坏死因子 (TNF) 相关的凋亡诱导配体 (TRAIL),也被称为 Apo2 配体,最初是根据其与 TNF 和 Fas/Apo 配体的序列同源性被发现的,为 TNF 家族细胞因子成员,或者为 Ⅱ 型膜蛋白或可溶性蛋白 (1,2)。TRAIL 在各种转化的细胞系中诱导细胞凋亡,并在抗肿瘤和抗病毒免疫监视中起重要作用 (3)。TRAIL 通过结合死亡受体 DR4 (TRAIL-R1) (4) 和 DR5 (TRAIL-R2) (5-8)进行信号转导,可引发细胞凋亡和 NF-κB 活化 (7,9)。这些受体上的死亡结构域可募集死亡诱导的信号转导复合体 (DISC),激活 Caspase-8 和随后的 Caspase-3。此外,TRAIL 还结合诱饵受体 DcR1 (TRAIL-R3) (6,8,10,11) 和 DcR2 (TRAIL-R4, TRUNDD) (12,13),这些受体缺乏拮抗 TRAIL 所致凋亡的功能性胞浆死亡结构域。已经确定骨保护素 (OPG) 也是一种能抑制 TRAIL 诱导的细胞凋亡的受体 (14)。与正常细胞相比,可溶性 TRAIL 在转化的细胞中触发凋亡时有选择性,这种选择性已经导致研究其作为潜在的癌症治疗药 (15,16)。
探索与本品相关的通路。
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