Cat. # | Size | Price | Inventory |
---|---|---|---|
21799S | 100 µl (50 tests) |
REACTIVITY | H M |
SENSITIVITY | Endogenous |
MW (kDa) | |
Source/Isotype | Rabbit IgG |
Product Information
Application | Dilution |
---|---|
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) | 1:50 |
All reagents required for this protocol may be efficiently purchased together in our Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593, or individually using the catalog numbers listed below.
NOTE: Prepare solutions with reverse osmosis deionized (RODI) or equivalent grade water.
NOTE: When including fluorescent cellular dyes in your experiment (including viability dyes, DNA dyes, etc.), please refer to the dye product page for the recommended protocol. Visit www.cellsignal.com for a full listing of cellular dyes validated for use in flow cytometry.
NOTE: Adherent cells or tissue should be dissociated and in single-cell suspension prior to fixation.
NOTE: Optimal centrifugation conditions will vary depending upon cell type and reagent volume. Generally, 150-300g for 1-5 minutes will be sufficient to pellet the cells.
NOTE: If using whole blood, lyse red blood cells and wash by centrifugation prior to fixation.
NOTE: Antibodies targeting CD markers or other extracellular proteins may be added prior to fixation if the epitope is disrupted by formaldehyde and/or methanol. The antibodies will remain bound to the target of interest during the fixation and permeabilization process. However, note that some fluorophores (including PE and APC) are damaged by methanol and thus should not be added prior to permeabilization. Conduct a small-scale experiment if you are unsure.
NOTE: Count cells using a hemocytometer or alternative method.
posted July 2009
revised June 2020
实验步骤编号:407
人, 小鼠
使用与人 Aiolos 蛋白 Pro46 周围的残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
Aiolos 是一种 Ikaros 家族转录因子,包含多种锌指结构,这些结构可介导 DNA 结合以及与其他 Ikaros 家族成员发生的同源二聚化或异源二聚化 (1)。通过可编码氨基末端锌指结构的部分转录基因所发生的选择性剪切来可产生多种 Aiolos 同工型 (2)。Aiolos 在淋巴组织中表达,其在成熟 B 和 T 细胞中的表达水平最高 (1)。Ikaros 家族蛋白通过将染色质重塑复合体募集到 DNA 来控制淋巴细胞发育 (3)。Aiolos 缺失小鼠的 B 细胞激活阈值降低,增殖增强并且 IgG 和 IgE 水平升高。此外,Aiolos 缺陷型小鼠会出现 B 细胞淋巴瘤 (4)。在 T 细胞中,Aiolos 可通过抑制 IL-2 表达促进 Th17 细胞分化 (5)。Aiolos 在转化上皮细胞中的异常表达会通过下调黏附相关基因而促进锚定非依赖性 (6)。在周围的单倍体急性淋巴细胞性白血病中可观察到 Aiolos 基因表达改变,并且包含 Aiolos 的基因位点与类风湿关节炎和系统性红斑狼疮的易感性增加有关 (7-9)。
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